柱層析硅膠廠家為您介紹薄層層析硅膠的層析方法
簿層層析:薄層層析是一種簡(jiǎn)便、快速、微量的層析方法。一般將柱層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上,形成一薄層進(jìn)行層析時(shí)一即稱薄層層析。其原理與柱層析基本相似。下面柱層析硅膠廠家為您介紹薄層層析硅膠的層析方法有哪些。
1.薄層層析的特點(diǎn):薄層層析在應(yīng)用與操作方面的特點(diǎn)與柱層析的比較。
2.吸附劑的選擇:薄層層析用的吸附劑與其選擇原則和柱層析相同。主要區(qū)別在于薄層層析要求吸附劑(支持劑)的粒度更細(xì),一般應(yīng)小于250目,并要求粒度均勻。用于薄層層析的吸附劑或預(yù)制薄層一般活度不宜過高,以Ⅱ~Ⅲ級(jí)為宜。而展開距離則隨薄層的粒度粗細(xì)而定,薄層粒度越細(xì),展開距離相應(yīng)縮短,一般不超過10厘米,否則可引起色譜擴(kuò)散影響分離效果。
3.展開劑的選擇:薄層層析,當(dāng)吸附劑活度為一定值時(shí)(如Ⅱ或Ⅲ級(jí)),對(duì)多組分的樣品能否獲得滿意的分離,決定于展開劑的選擇。中草藥化學(xué)成分在脂溶性成分中,大致可按其極性不同而分為無極性、弱極性、中極性與強(qiáng)極性。但在實(shí)際工作中,經(jīng)常需要利用溶劑的極性大小,對(duì)展開劑的極性予以調(diào)整。
4. 特殊薄層:針對(duì)某些性質(zhì)特殊的化合物的分離與檢出,有時(shí)需采用一些特殊薄層。
① 熒光薄層:有些化合物本身無色,在紫外燈下也不顯熒光,又無適當(dāng)?shù)娘@色劑時(shí),則可在吸附劑中加入熒光物質(zhì)制成熒光薄層進(jìn)行層析。展層后置于紫外光下照射,薄層板本身顯熒光,而樣品斑點(diǎn)處不顯熒光,即可檢出樣品的層析位置。常用的熒光物質(zhì)多為無機(jī)物。其一是在 254nm紫外光激發(fā)下顯出熒光的,如錳激潔的硅酸鋅。另一種為在365nm紫外光激發(fā)下發(fā)出熒光的,如銀激化的硫化鋅硫化鎬。
?、?絡(luò)合薄層:常用的有硝酸銀薄層,用來分離碳原子數(shù)相等而其中C一C雙鍵數(shù)目不等的一系列化合物,如不飽和醇、酸等。其主要機(jī)理是由于C一C鍵能與硝酸銀形成絡(luò)合物,而飽和的C一C鍵則不與硝酸銀絡(luò)合。因此在硝酸銀薄層上,化臺(tái)物可由于飽和程度不同而獲得分離。層析時(shí)飽和化合物由于吸附弱而Rf強(qiáng),含一個(gè)雙鍵的較含兩個(gè)雙鍵的Rf值高,含一個(gè)三鍵的較含一個(gè)雙鍵的Rf值高。此外,在一個(gè)雙鍵化臺(tái)物中,順式的與硝酸銀絡(luò)合較反式的易于進(jìn)行。因此,還可用來分離順反異構(gòu)體。
?、?酸堿薄層和PH緩沖薄層:為了改變吸附劑原來的酸堿性,可在鋪制薄層時(shí)采用稀酸或稀堿以代替水調(diào)制薄層。例如硅膠帶微酸性,有時(shí)對(duì)堿性物質(zhì)如生物堿的分離不好,如不能展層或拖尾,則可在鋪薄層時(shí),用稀堿溶液0.1~0.5NNa0H溶液制成堿性硅膠薄層。例如豬屎豆堿在以硅膠為吸附劑時(shí),以氯仿-丙酮一甲醇(8:2:1)為展開劑Rf<0.1,采用堿性硅膠薄層用上述相同展開劑,Rf值增至0.4左右。說明豬屎豆堿為--堿性生物堿。
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