柱層析硅膠操作方法：

勻漿法：

1.稱重:200-300目硅膠，稱30-70倍于上樣量；如果很難區(qū)分，也可以用100倍的硅膠H。干硅膠的視密度約為0.4，所以可以稱之為40g硅膠，燒杯量為100毫升。

2.攪拌均勻漿料：用玻璃棒充分?jǐn)嚢韪晒枘z體積的兩倍溶劑。如果洗滌劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮系統(tǒng)，則與石油醚混合；如果洗滌劑是氯仿/醇系統(tǒng)，則使用氯仿。如果不能攪拌均勻漿料，則表明溶劑含水量過(guò)高，特別是乙酸乙酯/丙酮。如果不與水配伍，則須提前用無(wú)水硫酸鈉長(zhǎng)期干燥。氯仿用無(wú)水氯化鈣干燥，以去除1%的醇。如果樣品對(duì)酸敏感，則不能使用氯仿系統(tǒng)通過(guò)柱。

3.安裝柱子：用棉花塞住柱子底部，無(wú)需使用海砂。加入約1/3體積的石油醚（氯仿），安裝儲(chǔ)液球，打開(kāi)柱下活塞，一次將勻漿倒入儲(chǔ)液球中。隨著沉降，一些硅膠會(huì)粘在儲(chǔ)液球上，并用石油醚（氯仿）沖入柱中。

4.壓實(shí)：沉降完成后，加入更多的石油醚，用雙聯(lián)球或氣泵加壓，直至流速恒定。柱床大約被壓縮到9/10體積。無(wú)論是常規(guī)壓力柱還是加壓柱，都應(yīng)采取這一步驟，這可以大大提高分離度，避免柱床柱時(shí)萎縮引起的開(kāi)裂。

5.樣品：干濕法可以。海沙是不必要的。取樣后，加入一些洗滌劑，然后將一團(tuán)脫脂棉塞到硅膠表面附近。然后你可以添加大量的洗滌劑，而不會(huì)破壞硅膠表面。

6.過(guò)柱和收集：柱層分析實(shí)際上是擴(kuò)散和分離之間的權(quán)衡。洗滌強(qiáng)度過(guò)低不好。建議使用梯度洗滌。收集例：10mg樣品量，1g硅膠H，0.5ml蒸餾；1-2g樣品量，50g硅膠（200-300目），20-50ml蒸餾。

7.檢測(cè):多使用專用噴霧劑。如果只使用紫外線燈，會(huì)損失更多的產(chǎn)品。紫外線的靈敏度一般比噴霧劑底部高1-2個(gè)數(shù)量級(jí)。

8.發(fā)光譜：收集到的產(chǎn)品通常需要在發(fā)光譜新結(jié)晶。如果樣品太少或液體，可以通過(guò)一個(gè)小凝膠柱作為送譜前的凈化手段。所謂的硅膠峰可以去除氫譜約1.5ppm。

干式樣品一般用于固體或高粘度的液體樣品。樣品用低沸點(diǎn)易溶劑溶解，加入1-3倍厚硅膠，干燥或旋轉(zhuǎn)干燥。干燥的標(biāo)準(zhǔn)是將硅膠制成細(xì)粉，而不是粘在瓶壁上。在安裝好的柱子上留下溶劑，慢慢進(jìn)入吸附樣品的硅膠，振動(dòng)柱子或添加一些溶劑，清洗粘在柱壁上的硅膠。

安裝柱子時(shí)，無(wú)論是濕法還是干法，用節(jié)橡膠管敲打，使柱子安裝均勻。只有柱子安裝均勻，分離效果才能好。

一般柱下的死體積太大，太大，許多分離的物質(zhì)被重新組合在一起，導(dǎo)致分離失敗。RF值超過(guò)柱，這取決于分離化合物的情況。如果產(chǎn)品相對(duì)干凈，雜質(zhì)點(diǎn)相距較遠(yuǎn)，則RF值可以較大或分離。如果雜質(zhì)點(diǎn)較多，TLC距離較近，RF值應(yīng)較小，為0.1~0.2。

壓力可以提高洗滌劑的流動(dòng)速度，減少產(chǎn)品收集時(shí)間，但也可以減少柱子的塔板數(shù)量。

當(dāng)其他條件相同時(shí)，常壓柱效率高，但時(shí)間也長(zhǎng)，如天然化合物的點(diǎn)。

離開(kāi)，一根柱子個(gè)月也有。

減壓柱可以減少硅膠的使用，感覺(jué)可以節(jié)省一半或更多，但由于大量的空氣通過(guò)。

硅膠會(huì)使溶劑揮發(fā)（有時(shí)在柱外有水蒸氣凝結(jié)），以及一些更容易分解的東西。

不，還須同時(shí)使用泵(噪音大，時(shí)間長(zhǎng))。以前有很多。

減壓柱，對(duì)它有很深的感情，但自從嘗試加壓以來(lái)，幾乎再也沒(méi)有動(dòng)過(guò)減壓的念頭。

頭了。