淺析柱層析硅膠的幾個技巧
柱色譜通常被稱為柱色譜,是色譜中使用的方法之一。對于含有多種有機物質的混合樣品,當無法再次結晶時,柱層析硅膠法可以說是有機實驗中有效的分離方法。固定相的吸附柱通常用硅和氧化鋁制成。硅膠色譜的分離原理是根據物質對硅膠的吸附能力來分離的。一般來說,極性物質容易吸附在硅膠上,極性弱的物質不容易吸附在硅膠上。整個色譜過程是吸附.解吸.再吸附.再次解吸的過程。
許多柱層硅膠化學實驗書都描述了主層分析實驗方法,但大多數數量被廣泛描述,有些描述不適用于實驗室。例如,許多書籍提到,安裝柱子時,先在底部鋪上石英砂,倒入固定桌子,然后在上面鋪上石英砂。麻煩,效果不好,不適合實驗室。本文根據多年使用柱層硅膠的操作經驗,總結了使用柱層時的一些技巧。
使用柱層析硅膠
短層容易長或短裝柱,有時會留下大量的硅,浪費硅,這主要是因為對硅等固定相的使用不確定。柱層分析硅一般為100-200目,100毫升硅質量約為47克,安裝直徑為2.8厘米的柱可容納18厘米高。
使用洗脫劑。
洗滌劑的極性由薄層決定,一般應將樣品Rf值分離為0.2-0.3。選用的洗滌劑應該在很大程度上擴大相鄰兩種物質Rf價值之間的差異。別以為在木板上爬得高就好了。Rf是0.然后,即使差距為0,.也很難從柱層分手。柱層是一個多次攀爬的過程,所以可以通過公式進行比較。0.6/0.8一次分離肯定不如(0.2/0.3)三次或四次方形。柱層硅膠有時應在薄層上看到分離效果,但越過柱層時很難分離。主要原因是薄層分析比柱層分析用硅細很多,所以分離效果很好。解決辦法是降低稅收制度的極性。一般來說,柱層分析中使用的洗滌劑比薄層分析中使用的展示劑的極性低一倍,可以達到好的分離效果。當分離物的極性范圍較大時,可以使用梯度洗脫法逐漸增加溶劑的極性,逐一洗掉吸附在硅膠上的其他化合物。
常用的擴展劑極性低的乙酸乙酯:石油醚系統(tǒng);極性甲醇:氯仿系統(tǒng);極性甲醇:水:正丁醇:醋酸系統(tǒng);拖車可以加入少量氨水或冰醋酸。對于難以分離的化合物,一是增加柱子的長度和直徑,二是降低洗滌劑的極性,使混合物能夠很好地分離。在同樣可以清洗的情況下,使用毒性小的洗滌劑。比如乙酸乙酯:石油醚系統(tǒng)和二氯甲烷:石油醚系統(tǒng)在同樣可溶性的情況下,應使用毒性小的乙酸乙酯:石油醚系統(tǒng)。此外,洗滌劑通過柱子后應注意。